परिचय

1. साहित्य समीक्षा

1.2 रोगज़नक़ का जीव विज्ञान

2 खुद का शोध

निष्कर्ष

परिचय

मनुष्यों और मांसाहारियों का संक्रमण केवल कच्ची (पिघली हुई, जमी हुई, हल्की नमकीन) और अधपकी या अधपकी मछली खाने से होता है।

ओपिसथोर्चिस मेटासेकेरिया झील साइप्रिनिड्स के मांसपेशी ऊतक में पाए जाते हैं। लेक कार्प (क्रूसियन कार्प, लेक मिनो, आदि), साथ ही नदी (सिरप, बारबेल, आदि) साइप्रिनिड प्रायोगिक परिस्थितियों में भी संक्रमित नहीं होते हैं।

opisthorchiasis मछली पशु चिकित्सा परीक्षण

1. साहित्य समीक्षा

1.1 मछली का ओपिसथोरचिआसिस और कजाकिस्तान गणराज्य के क्षेत्र में इसका प्रसार

कजाकिस्तान गणराज्य की अनूठी प्राकृतिक परिस्थितियाँ और जल विज्ञान शासन की विशिष्टताएँ ओपिसथोरचियासिस के फॉसी के स्थिर कामकाज को सुनिश्चित करती हैं। यह रोगज़नक़ के लार्वा द्वारा मछली के महत्वपूर्ण संक्रमण के कारण है, आबादी के आहार में साइप्रिनिड परिवार (कार्प, ब्रीम, क्रूसियन कार्प, आइड, चेबक, रोच, टेनच, कार्प) से मछली का बड़ा हिस्सा है। उत्तरी और मध्य कजाकिस्तान, और इस हेल्मिंथियासिस को रोकने के उपायों के ज्ञान का निम्न स्तर। हालाँकि 1929 में, के.आई. के नेतृत्व में एक अभियान द्वारा अनुसंधान किया गया था। स्क्रिपियन की पहचान की गई व्यापक उपयोगइरतीश बेसिन में ओपिसथोरचियासिस आज भी कायम है उच्च स्तरओपिसथोर्चिस फेलिनस लार्वा से मछली का संक्रमण (80.0 - 90.0%)।

1.2 रोगज़नक़ का जीव विज्ञान

एक परिपक्व ओपिसथोर्चिस 0.2 से 1.2 सेमी तक लंबा और 0.3 सेमी तक चौड़ा एक चपटा कृमि है, मेजबान के शरीर में इसका निवास स्थान यकृत की पित्त नलिकाएं है। पित्ताशय की थैलीऔर अग्न्याशय नलिकाएं।

1.3 मछली ओपिसथोरचियासिस का प्रेरक एजेंट और कई भौतिक और रासायनिक कारकों के प्रति इसका प्रतिरोध

जीवित मछलियों में मेटासेकेरिया 5-8 वर्षों तक अपनी व्यवहार्यता और आक्रामकता बनाए रखता है। वे कम तापमान के प्रति बहुत प्रतिरोधी हैं। जमी हुई मछली में, लार्वा - 40 डिग्री सेल्सियस पर 7 घंटे तक, - 35 डिग्री सेल्सियस पर 14 घंटे तक, - 28 डिग्री सेल्सियस पर 32 घंटे तक अपनी व्यवहार्यता खो देते हैं। उच्च तापमान पर मछली को फ्रीज करने से इसकी पूर्ण कीटाणुशोधन की गारंटी नहीं होती है . मेटासेकेरिया उच्च तापमान के प्रति संवेदनशील होते हैं। एक बार मछली से निकलने के बाद, वे 5 मिनट के भीतर 55°C पर मर जाते हैं। नमकीन बनाते समय, यदि मछली में नमक का अनुपात 14% है, और नमकीन पानी का घनत्व 1.2 है, तो छोटी मछलियों में मेटासेकेरिया 10 से 21 दिनों तक (मछली के प्रकार के आधार पर) जीवित रहता है, और बड़ी मछलियों में, 25 सेमी से अधिक लंबाई में जीवित रहता है। (आइडीई, ब्रीम , लाइन), - 40 दिनों तक।

2 खुद का शोध

2.1 वस्तुएँ, विधियाँ और सामग्री

अध्ययन की वस्तुएँ रोगज़नक़ ओपिसथोरिस फेलिनस, कार्प परिवार की मछली - क्रूसियन कार्प थीं।

मछली के ऊतकों में मेटासेकेरिया का पता लगाने के लिए संपीड़न का उपयोग किया गया था। मछली की पूरी सतह के मांसपेशी ऊतक की जांच करके अधिक सटीक परिणाम प्राप्त किए गए, जिसे त्वचा और पंखों से चमड़े के नीचे के वसा ऊतक के साथ सावधानीपूर्वक अलग किया गया था।

संपीड़न विधि। संपीड़न अध्ययन के लिए, समय बचाने के लिए, मछली के दोनों तरफ चमड़े के नीचे के ऊतकों वाली मांसपेशियों के 5 नमूनों की जांच की गई: पृष्ठीय से 3 नमूने और प्रत्येक तरफ पेट की मांसपेशियों से 2 नमूने। प्रत्येक मांसपेशी का नमूना 1 - 2 वर्ग मीटर के क्षेत्र से लिया गया था। 2 - 3 मिमी की गहराई पर सेमी.

जांच किए जाने वाले मांसपेशी ऊतक को कुचल दिया गया था और 1 - 1.5 ग्राम के हिस्सों को 6 - 8 x 12 - 15 सेमी मापने वाले दो गिलासों के बीच रखा गया था।

तैयार संपीड़न तैयारियों को 16x आवर्धन पर एक दूरबीन के नीचे देखा गया। 4 मेटासेकेरिया पाए गए।

2.1.2 ऑर्गेनोलेप्टिक अनुसंधान विधियाँ

ओपिसथोरचिआसिस मेटासेकेरिया से प्रभावित मछली में, बाहरी परिवर्तनअनुपस्थित थे.

2.1.3 भौतिक-रासायनिक अनुसंधान विधियाँ

अमोनिया का निर्धारण. यह विधि मछली के खराब होने पर बनने वाले अमोनिया की हाइड्रोक्लोरिक एसिड और अमोनियम क्लोराइड के बादल की उपस्थिति के साथ परस्पर क्रिया पर आधारित है।

विश्लेषण का संचालन करना। एबर्ट के मिश्रण का 2-3 सेमी3 एक चौड़ी परखनली में डाला गया, ढक्कन लगाया गया और 2-3 बार हिलाया गया। स्टॉपर को टेस्ट ट्यूब से हटा दिया गया और तुरंत दूसरे स्टॉपर से बंद कर दिया गया, जिसके माध्यम से घुमावदार सिरे वाली एक पतली कांच की छड़ को गुजारा गया। अध्ययन के तहत मछली के मांस का एक टुकड़ा विश्लेषण के समय प्रयोगशाला में हवा के तापमान के करीब के तापमान पर छड़ी के अंत से जुड़ा हुआ था। मांस को टेस्ट ट्यूब में डाला गया ताकि टेस्ट ट्यूब की दीवारों पर दाग न लगे और यह तरल स्तर से 1-2 सेमी की दूरी पर रहे।

परिणामों का प्रसंस्करण। कुछ सेकंड के बाद, हाइड्रोक्लोरिक एसिड के साथ अमोनिया की प्रतिक्रिया से अमोनियम क्लोराइड का एक बादल बनना चाहिए। प्रतिक्रिया की तीव्रता का आकलन इस प्रकार किया गया: - नकारात्मक प्रतिक्रिया; + कमजोर सकारात्मक प्रतिक्रिया (जल्दी से गायब होने वाला धुंधला बादल); ++ प्रतिक्रिया सकारात्मक है (एक स्थिर बादल जो अभिकर्मक के साथ टेस्ट ट्यूब में मांस जोड़ने के कुछ सेकंड बाद दिखाई देता है); - एच-+ प्रतिक्रिया तेजी से सकारात्मक है (अभिकर्मक के साथ टेस्ट ट्यूब में मांस डालने के तुरंत बाद एक बादल दिखाई देता है)।

हाइड्रोजन सल्फाइड का निर्धारण. यह विधि मछली के खराब होने के दौरान बनने वाले हाइड्रोजन सल्फाइड की सीसा नमक के साथ परस्पर क्रिया पर आधारित है, जिसमें लेड सल्फाइड के बनने के कारण गहरा रंग दिखाई देता है।

विश्लेषण का संचालन करना। मछली की पृष्ठीय मांसपेशियों से अध्ययनित कीमा का 15-25 ग्राम 40-50 सेमी3 की क्षमता वाली एक बोतल में एक ढीली परत में रखा गया था। एक बोतल में, मोटे फिल्टर पेपर की एक पट्टी को कीमा के ऊपर क्षैतिज रूप से लटका दिया गया था, जिसकी सतह पर, कीमा के सामने, 2-3 मिमी के व्यास के साथ सीसा नमक के घोल की 3-4 बूंदें लगाई गई थीं। कागज और कीमा की सतह के बीच की दूरी 1 सेमी है। बोतल को ढक्कन के साथ शीर्ष पर बंद कर दिया गया था, ढक्कन और बोतल के शरीर के बीच फिल्टर पेपर को क्लैंप किया गया था, और कमरे के तापमान पर खड़े रहने के लिए छोड़ दिया गया था। समानांतर में आयोजित किया गया बेंचमार्क विश्लेषणउत्पाद का वजन किये बिना. 15 मिनट के बाद, कागज को हटा दिया गया और उसके रंग की तुलना सीसे के नमक के उसी घोल में भिगोए गए कागज के रंग से की गई (नियंत्रण विश्लेषण)। यदि परीक्षण नमूने में मुक्त हाइड्रोजन सल्फाइड है, तो सीसा नमक के घोल से सिक्त कागज के खंड भूरे या काले पड़ जाते हैं।

प्रतिक्रिया की तीव्रता निम्नानुसार निर्दिष्ट की गई थी: - नकारात्मक प्रतिक्रिया; ± बूंद के दाग के निशान; + कमजोर सकारात्मक प्रतिक्रिया; ++ सकारात्मक प्रतिक्रिया (पूरी बूंद का रंग भूरा, किनारों पर अधिक तीव्र); +++ प्रतिक्रिया अत्यंत सकारात्मक है (पूरी बूंद का गहरा भूरा रंग)।

पीएच का निर्धारण. 5 ग्राम कीमा बनाया हुआ मछली के मांस में, 50 मिलीलीटर आसुत जल मिलाया गया और कभी-कभी हिलाते हुए 30 मिनट तक डाला गया, फिर एक पेपर फिल्टर के माध्यम से पारित किया गया। छानने का प्रयोग अनुसंधान के लिए किया गया था। पीएच का निर्धारण पीएच मीटर (हन्ना पीएच 211) से किया गया। यह ध्यान में रखा गया कि ताजी मछली में निस्पंद थोड़ा ओपलेसेंट (पीएच 6.9 तक) होता है; संदिग्ध ताजगी वाली मछली में, छानना थोड़ा बादलदार होता है (पीएच 7.0-7.2); बासी मछली में बादल छाए हुए फिल्टर और एक अप्रिय गंध (पीएच 7.3 और अधिक) होता है।

पेरोक्सीडेज प्रतिक्रिया. गिल ऊतक से 2 मिलीलीटर जलीय अर्क (1:100) को एक बैक्टीरियोलॉजिकल टेस्ट ट्यूब में जोड़ा गया और बेंज़िडाइन के 0.2% अल्कोहल समाधान की 5 बूंदें डाली गईं। टेस्ट ट्यूब की सामग्री को हिलाया गया, जिसके बाद 1% हाइड्रोजन पेरोक्साइड समाधान की दो बूंदें डाली गईं।

2.1.4 निर्धारण विधियाँ रासायनिक संरचनामछली का मांस

मछली के मांस की रासायनिक संरचना निर्धारित करने के लिए, हमने उज़िनकोल क्षेत्र में बोल्शोय झील से पकड़ी गई ताज़ा मृत मछली (दो वर्षीय क्रूसियन कार्प की पीठ की मांसपेशियों से) के नमूनों का उपयोग किया।

100-105 सी पर सुखाकर पानी के द्रव्यमान अंश का निर्धारण। यह विधि गर्मी उपचार के दौरान उत्पाद से पानी के वाष्पीकरण और वजन करके द्रव्यमान में परिवर्तन का निर्धारण करने पर आधारित है।

1.5 से 2 ग्राम तक की रीढ़ की मांसपेशियों का एक नमूना, जिसका वजन 0.001 ग्राम से अधिक नहीं की पूर्ण त्रुटि के साथ किया गया था, को एक कांच की छड़ के साथ एक साफ, सूखी और टेरी बोतल में रखा गया था, जिसकी मदद से उत्पाद का नमूना लिया गया था। एक समान पतली परत में बोतल में वितरित किया गया। बोतल को एक ढक्कन के साथ बंद कर दिया गया था, एक विश्लेषणात्मक तराजू पर तौला गया था और लगातार वजन तक 100-105 डिग्री पर ओवन में सुखाया गया था। पहला वजन सुखाने की शुरुआत के 3 घंटे बाद किया गया, बाद का - 30-40 मिनट के बाद। यदि दो तोलों के बीच का अंतर 0.001 ग्राम से अधिक न हो तो एक स्थिर द्रव्यमान प्राप्त माना जाता था। पहले तोलने वाली बोतल में 5-10 ग्राम रेत डाली जाती थी और उत्पाद का नमूना अच्छी तरह मिलाया जाता था।

प्रतिशत के रूप में X3 के द्रव्यमान अंश की गणना सूत्र X3 = (mrm2) 100/mi-m का उपयोग करके की गई थी, जहां m रेत के साथ तोलने वाली बोतल का द्रव्यमान है, g, t\ एक नमूने के साथ तोलने वाली बोतल का द्रव्यमान है और सूखने से पहले रेत, जी; टी2 - सूखने के बाद नमूने और रेत के साथ बोतल का वजन, जी।

पीछे अंतिम परिणामदो समानांतर निर्धारणों के परिणामों का अंकगणितीय माध्य लिया गया, जिनके बीच अनुमेय अंतर 0.5% से अधिक नहीं था।

केजेल्डहल के अनुसार प्रोटीन के द्रव्यमान अंश का निर्धारण। यह विधि उत्प्रेरक की उपस्थिति में सल्फ्यूरिक एसिड में कार्बनिक पदार्थों को जलाकर, भाप के साथ परिणामी अमोनिया को आसवित करके, सल्फ्यूरिक एसिड के समाधान के साथ फंसाकर और अनुमापन द्वारा नाइट्रोजन सामग्री का निर्धारण करके कार्बनिक पदार्थों के ऑक्सीकरण पर आधारित है।

0.6-1 ग्राम वजन वाले मांसपेशी ऊतक के एक नमूने को 0.0005 ग्राम से अधिक की पूर्ण त्रुटि के साथ तौला गया, 100 सेमी की क्षमता वाले एक दहन फ्लास्क में रखा गया, कॉपर सल्फेट के कई छोटे क्रिस्टल जोड़े गए और 10-20 सेमी 3 सल्फ्यूरिक 1840 किग्रा/मीटर घनत्व वाला एसिड डाला गया। तरल पदार्थ के छींटों से बचने के लिए फ्लास्क को धूआं हुड में सावधानी से गर्म किया गया था। जब फ्लास्क की सामग्री एक समान हो गई, तो हीटिंग बंद कर दिया गया, ठंडा होने दिया गया, 0.5 ग्राम पोटेशियम सल्फेट मिलाया गया और तब तक गर्म किया जाता रहा जब तक कि फ्लास्क में तरल पारदर्शी, भूरे रंग के बिना हरे-नीले रंग का नहीं हो गया। दहन के अंत में, फ्लास्क की सामग्री को ठंडा किया गया और मात्रात्मक रूप से 500-750 सेमी3 की क्षमता वाले आसवन फ्लास्क में स्थानांतरित किया गया, रिसीवर 250-300 सेमी3 की क्षमता वाला एक शंक्वाकार फ्लास्क था, जिसमें 25-30 सेमी3 था। 0.05 मोल/डीएम सल्फ्यूरिक एसिड। रेफ्रिजरेटर ट्यूब के सिरे को सल्फ्यूरिक एसिड के घोल में डुबोया गया। सावधानी से, दीवारों के साथ, तरल पदार्थों के मिश्रण से बचने के लिए, 50-70 सेमी सोडियम हाइड्रॉक्साइड घोल 330 ग्राम/डीएम को आसवन फ्लास्क में डाला गया, लिटमस पेपर का एक टुकड़ा डाला गया और एक ड्रॉप कैचर के माध्यम से जुड़े स्टॉपर के साथ तुरंत बंद कर दिया गया। एक रेफ्रिजरेटर, सामग्री को सावधानीपूर्वक मिलाया गया और गर्म किया गया। फ्लास्क में तरल की प्रतिक्रिया तीव्र क्षारीय होनी चाहिए। फ्लास्क में तरल उबलने के बाद, रिसीवर को नीचे कर दिया गया ताकि रेफ्रिजरेटर ट्यूब का सिरा घोल की सतह से कुछ दूरी पर रहे और आसवन तब तक जारी रखा जाए जब तक कि तरल का कम से कम 2/3 भाग आसुत न हो जाए। आसवन का अंत लिटमस पेपर द्वारा निर्धारित किया गया था। यदि आसवन पूरा हो गया है, तो आसवन की एक बूंद के कारण लाल लिटमस पेपर नीला नहीं हो जाना चाहिए। आसवन के अंत में, कंडेनसर ट्यूब के सिरे को प्राप्त फ्लास्क में पानी से धोया गया और इसमें मौजूद अतिरिक्त सल्फ्यूरिक एसिड को मिथाइल रेड की उपस्थिति में सोडियम हाइड्रॉक्साइड 0.1 mol/dm के घोल के साथ अनुमापन किया गया। उसी समय, परीक्षण नमूने का वजन किए बिना नियंत्रण विश्लेषण किया गया।

2.1.5 स्वच्छता सूक्ष्मजैविक अनुसंधान विधियाँ

रोसोलिक एसिड (ऑरिन) के घोल से धुंधलापन का उपयोग किया गया।

लार्वा के साथ मांसपेशियों के टुकड़ों को वसा से मुक्त किया गया। रोसोलिक एसिड की बूंदें ऊतक पर लगाई गईं, और 2 मिनट के बाद, पोटेशियम हाइड्रॉक्साइड का 0.1 एन समाधान लागू किया गया, इसे ऊतक पर समान रूप से वितरित किया गया। फिल्टर पेपर का उपयोग करके तैयारी से अतिरिक्त तरल हटा दिया गया था। कवर ग्लास से ढका गया और माइक्रोस्कोप के नीचे जांच की गई। इन प्रयोगों में, मछली के ऊतकों पर गुलाबी रंग का दाग था; जीवित लार्वा बिल्कुल भी दागदार नहीं थे; मृत लार्वा गुलाबी हो गया।

इसे 2 समानांतर व्यंजनों में मांस-अर्क अगर पर चढ़ाने से भी निर्धारित किया गया था, केसलर माध्यम पर चढ़ाने और घने अंतर एंडो माध्यम पर सकारात्मक नमूनों के बाद के उपसंस्कृति द्वारा निर्धारित किया गया था; एस. ऑरियस को नमकीन मछली पेप्टोन शोरबा पर टीकाकरण और उसके बाद एक वैकल्पिक माध्यम - जर्दी-नमक अगर पर उपसंस्कृति द्वारा निर्धारित किया गया था; जीनस साल्मोनेला के बैक्टीरिया को एक संवर्धन माध्यम (सेलेनाइट शोरबा) पर टीकाकरण द्वारा निर्धारित किया गया था, इसके बाद घने विभेदक निदान माध्यम - बिस्मथ-सल्फाइट अगर पर पेट्री डिश में उपसंस्कृति की गई; एल. मोनोसाइटोजेन्स बैक्टीरिया को चयनात्मक पूर्व-संवर्द्धन माध्यम (फ्रेजर शोरबा) पर टीकाकरण और पीएएल चयनात्मक निदान माध्यम पर बाद के उपसंस्कृति द्वारा निर्धारित किया गया था।

सूक्ष्मजीवविज्ञानी संकेतकों के अध्ययन से पता चला है कि मछली के मांस से एआई के 51 से अधिक नमूने हैं। एस्चेरिचिया कोली सीरोटाइप O19 की एक संस्कृति को एक नमूने में अलग किया गया था, और एक नमूने में KMA-FAnM की अधिकता नोट की गई थी, जो SanPiN 2.3.2.1078-01 के अनुसार अनुमेय मानदंड से अधिक है। ओपिसथोरचियासिस से प्रभावित मछली के प्रायोगिक नमूनों से अवसरवादी सूक्ष्मजीवों के अलगाव को स्पष्ट रूप से मछली की त्वचा के माध्यम से उनके प्रवेश के दौरान लार्वा के साथ उनके प्रवेश, उनके प्रवासन और इसके संबंध में, सामान्य प्रतिरोध के कमजोर होने से समझाया जा सकता है। मछली का जीव.

2.2 ओपिसथोरचिआसिस से प्रभावित मछली को निष्क्रिय करने की विधियाँ

ताप उपचारसबसे विश्वसनीय हैं:

पानी में उबाल आने के बाद मछली को 150 ग्राम से बड़े टुकड़ों में 15-20 मिनट तक पकाएं। (बड़े नमूनों को टुकड़ों में काटें);

100 ग्राम से अधिक वजन वाले छोटे टुकड़ों में तलें, फैलाएं, त्वचा नीचे करें, एक ढक्कन के नीचे कम गर्मी पर 20-25 मिनट के लिए प्रत्येक तरफ पर्याप्त मात्रा में तेल में भूनें;

नमक छोटी मछली 14 दिनों के लिए, बड़े (25 सेमी से अधिक) 40 दिनों के लिए प्रति 10 किलोग्राम मछली में 2 किलोग्राम नमक, या प्रति 1 किलोग्राम मछली में 200 ग्राम नमक, और 3.5 किलोग्राम नमक की दर से सकारात्मक तापमान पर। प्रति 10 किलो मछली, लेकिन सूखा2-3 सप्ताह पर निर्भर करता है वातावरण की परिस्थितियाँ(यदि मौसम बरसात का है, तो 3 सप्ताह से अधिक समय तक शुष्क रहेगा) इसके बाद भीगना;

सूखा स्वाद के लिए प्रारंभिक राजदूत- 2 सप्ताह के भीतर (यदि नमकीन बनाने की तकनीक का पालन नहीं किया जाता है तो मछली को सुखाना निष्क्रिय करने की कोई विधि नहीं है);

70-80 के तापमान पर गर्म धूम्रपान हे 2.5 घंटे के लिए, इसमें नमक डालना और आइड को सुखाना अनुशंसित नहीं है घर पर,

उपयोग किए गए काटने के उपकरण को 3-5 मिनट तक उबालें और डिटर्जेंट का उपयोग करके अच्छी तरह से धो लें।

3. संकेत के तरीकों, व्यवहार्यता के निर्धारण आदि के तुलनात्मक मूल्यांकन पर शोध क्रमानुसार रोग का निदानमेटासेकेरिया ओ. felineus

यह भी ध्यान देने योग्य है कि जिन मछलियों का हमने अध्ययन किया उनमें से अधिकांश ट्रेमेटोड्स के अन्य मेटासेकेरिया से संक्रमित थीं, अर्थात्: पैराकेनोगोनिमस ओवेटस (परिवार प्रोहेमिस्टोमिडे), बोल्बोफोरस कन्फियसस (परिवार पोस्टहोडिप्लोस्टोमिडे)।

मेटासेकेरिया की प्रजाति का निर्धारण वी.ई. सुडारिकोव के अनुसार किया गया था। (2002)। उन्हें शारीरिक और रूपात्मक विशेषताओं के आधार पर विभेदित करने की आवश्यकता है, यह ध्यान में रखते हुए कि हमारे अध्ययन से पहले इन कंपकंपी की उपस्थिति का संकेत नहीं दिया गया था। इस प्रकार के कंपकंपी के विभेदन का सिद्धांत मेटासेकेरिया की संरचना, सिस्ट के आकार और आकार और सिस्ट से निकलने वाले मेटासेकेरिया के आकार और आकार पर आधारित है।

जब मछली में लार्वा का पता लगाया जाता है, जिसमें इसके कीटाणुशोधन की प्रभावशीलता का आकलन करना भी शामिल है, तो उनकी व्यवहार्यता निर्धारित करना आवश्यक है। हमने ओपिसथोर्चिस लार्वा की व्यवहार्यता निर्धारित करने के लिए कई तरीकों का तुलनात्मक मूल्यांकन किया है।

द्वारा रूपात्मक विशेषताएँ. एक विच्छेदन सुई का उपयोग करके मछली के ऊतकों से अलग किए गए ट्रेमेटोड के मेटासेकेरिया को एक बूंद में रखा गया था गर्म पानीया कांच की स्लाइड पर खारा घोल (37-40 डिग्री), कवरस्लिप से ढका जाता है और कम और उच्च आवर्धन माइक्रोस्कोप के तहत जांच की जाती है। पुटी झिल्ली की अखंडता का स्पष्ट उल्लंघन, स्थूल परिवर्तन आंतरिक संरचनालार्वा, इसकी सामग्री का विघटन, उत्सर्जन मूत्राशय का विनाश मेटासेकेरिया की मृत्यु के संकेत हैं। इन संकेतकों की अनुपस्थिति जीवित लार्वा की उपस्थिति को इंगित करती है।

तरीका यांत्रिक प्रभाव. जैसा कि ज्ञात है, मेटासेकेरिया में सिस्ट में रहते हुए गति करने की क्षमता होती है। लार्वा की सबसे कमजोर स्वतंत्र गतिविधियों की उपस्थिति भी इसकी व्यवहार्यता को इंगित करती है। इस संबंध में, कवर ग्लास के साथ मेटासेकेरिया को कमजोर रूप से दबाकर लार्वा की गति को उत्तेजित किया गया था।

रासायनिक एक्सपोज़र विधि। लार्वा की गति पशु पित्त या ट्रिप्सिन के कारण हो सकती है। एक रासायनिक अभिकर्मक की कई बूँदें पृथक मेटासेकेरिया पर लागू की गईं ताकि लार्वा को पूरी तरह से कवर किया जा सके। उत्तेजना को तेज करने के लिए, लार्वा के साथ एक स्लाइड ग्लास को अल्कोहल लैंप की लौ पर थोड़ा गर्म किया गया था। कुछ सेकंड के बाद, एक रासायनिक उत्तेजना के प्रभाव में, लार्वा सिस्ट से बाहर निकलना शुरू हो गया और सक्रिय रूप से आगे बढ़ना शुरू कर दिया, जो व्यवहार्यता के संकेतक के रूप में कार्य करता था। लार्वा के निष्कासन की प्रक्रिया की निगरानी माइक्रोस्कोप के तहत की गई। यदि 30 मिनट के भीतर कोई मोटर प्रतिक्रिया नहीं होती है, तो इसे लार्वा की मृत्यु माना जाना चाहिए।

निष्कर्ष

अध्ययनों ने निर्धारित किया है कि मेटासेकेरिया का पता लगाने का प्रतिशत विभिन्न समूहमांसपेशियाँ समान और औसत नहीं हैं रीढ़ की हड्डी की मांसपेशियाँएके - 51.52%, प्रोटोडोरसल - 28.84%, ऊपरी पुच्छ 15.94%, पेक्टोरल - 1.52%, उदर - 1.33% और निचला पुच्छ - 0.85%।

यह स्थापित किया गया है कि मछली में ओपिसथोरचियासिस एकल आक्रमण के रूप में या मिश्रित रूप में (ज्यादातर मामलों में) मेटासेकेरिया के साथ अन्य कंपकंपी को प्रभावित कर सकता है, जिसे ओपिसथोरचियासिस का निदान करते समय ध्यान में रखा जाना चाहिए।

ओपिसथोरचियासिस से प्रभावित मछली की बाहरी जांच और पैथोलॉजिकल जांच के दौरान, रोग का कोई नैदानिक ​​​​लक्षण और अंगों और ऊतकों में दिखाई देने वाले रोग संबंधी परिवर्तन नोट नहीं किए गए हैं, 7.4% की वृद्धि मंदता और शरीर के वजन में 1.5% की कमी के अपवाद के साथ। स्वस्थ मछली की तुलना में आक्रमण की उच्च तीव्रता वाली मछली, साथ ही मांसपेशियों के ऊतकों के छोटे क्षेत्रों के दानेदार अध: पतन के रूप में अपक्षयी परिवर्तनों की उपस्थिति, खोई हुई अनुप्रस्थ धारियां और मेटासेकेरिया के आसपास संयोजी ऊतक का प्रसार।

यह स्थापित किया गया है कि, ऑर्गेनोलेप्टिक और भौतिक रासायनिक संकेतकों के अनुसार, ओपिसथोरचियासिस से प्रभावित मछली का मांस सौम्य मछली की आवश्यकताओं के भीतर है और इसके आक्रमण की तीव्रता पर निर्भर नहीं करता है।

एक सैनिटरी माइक्रोबायोलॉजिकल अध्ययन के परिणामों के अनुसार, मछली का मांस कम और मध्यम तीव्रताआक्रमण आवश्यकताओं को पूरा करते हैं मौजूदा मानकमाइक्रोफ़्लोरा सामग्री, और कब उच्च तीव्रताई. कोलाई के स्तर की अधिकता देखी गई।

ओपिसथोरचियासिस से प्रभावित मछली के मांस की रासायनिक संरचना का अध्ययन करते समय, एक निर्भरता सामने आई कि आक्रमण की तीव्रता जितनी अधिक होगी, अधिक सामग्रीइसमें नमी और कम प्रोटीन, वसा, राख, कैल्शियम और फास्फोरस और कम कैलोरी सामग्री, जो कम होने का संकेत देती है ऊर्जा मूल्य, विशेष रूप से स्वस्थ मछली की तुलना में उच्च एआई (87.17 किलो कैलोरी) वाला मछली का मांस।

आयोजित अध्ययनों ने सापेक्ष में उल्लेखनीय कमी की प्रवृत्ति निर्धारित की जैविक मूल्य(2.7%) मछली का मांस ओपिसथोरचिआसिस से प्रभावित होता है, जिसमें उच्च स्तर का आक्रमण होता है।

प्रयुक्त साहित्य की सूची

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परीक्षा निम्नलिखित क्रम में की जाती है: त्वचा, पंख, मौखिक गुहा, गलफड़े, आंखें, रक्त, हृदय, पेट(यकृत, प्लीहा, स्विम ब्लैडर, मूत्राशय, पित्ताशय, गुर्दे, गोनाड, आंत), मांसपेशियां, सिर और मेरुदंड.

ट्रिपैनोज़ और क्रिप्टोबिया का पता लगाने के लिए, मछली के दिल से रक्त लिया जाता है और स्मीयर बनाया जाता है।

रक्त का थक्का जमने से रोकने के लिए, सोडियम साइट्रेट का 1% घोल डालें, कवरस्लिप और माइक्रोस्कोप से ढक दें। स्मीयर को सूखने से बचाने के लिए, कवर ग्लास के किनारों पर वैसलीन लगाया जाता है। उसी समय, कई रक्त स्मीयरों को हवा में सुखाया जाता है, मिथाइल अल्कोहल में स्थिर किया जाता है, रोमानोव्स्की-गिम्सा या हेमेटोक्सिलिन के साथ रंगा जाता है, और एक माइक्रोस्कोप के तहत जांच की जाती है।

जांच करने पर त्वचारंगद्रव्य धब्बे (काले) देखे जा सकते हैं। इन स्थानों में, मेटासेकेरिया पोस्टहोडिप्लोस्टोमम क्यूटिकुला त्वचा की मोटाई में स्थानीयकृत होते हैं। बुसेफालस फ्लूक सिस्ट पंखों पर पाए जाते हैं।

स्पोरोज़ोअन, कुछ सिलिअट्स और फ़्लूक लार्वा भी संयोजी संरचनाओं (ट्यूबरकल) में मौजूद हो सकते हैं; विच्छेदन सुई का उपयोग करके ट्यूबरकल की दीवार को तोड़ने के बाद ही उनका पता लगाया और हटाया जा सकता है। में रक्त वाहिकाएंगलफड़ों पर सेंगुइनियल अंडे, बीजाणु और कवक के मायसेलियम होते हैं।

दिलउन्हें बड़े जहाजों के साथ बाहर निकाला जाता है, एक शारीरिक समाधान के साथ एक बैक्टीरियोलॉजिकल डिश रखा जाता है, इसकी गुहाएं खोली जाती हैं, परिणामी तलछट को धोया जाता है और सेंगुइनेकोसिस और कुछ मेटासेकेरिया के प्रेरक एजेंट की उपस्थिति के लिए सूक्ष्म जांच की जाती है।

तिल्लीलीवर की तरह ही जांच की जाती है।

मूत्राशय. शोध तकनीक पित्ताशय के अध्ययन के समान है। में मूत्राशयफ्लूक, स्पोरोज़ोअन और सिलिअट्स का पता लगाएं।

मस्तिष्क और रीढ़ की हड्डीकंप्रेसर विधि का उपयोग करके जांच की गई। इन अंगों में स्पोरोज़ोअन्स मायक्सोसोमा सेरेब्रलिस टेट्रोकोटाइल वेरिगेटु पाए जा सकते हैं।

उपास्थि. मायक्सोसोमोसिस (सैल्मन वर्म) के प्रेरक एजेंट का पता लगाने के लिए, कंप्रेसर विधि का उपयोग करके कपाल और इंटरवर्टेब्रल उपास्थि की जांच की जाती है।

स्ट्रोक्सरोमानोव्स्की-गिएम्सा के अनुसार रक्त नीला-ईओसिन से सना हुआ है। पेंटिंग से पहले, तैयार रोमानोव्स्की पेंट को प्रति 1 मिलीलीटर पानी में 2 - 3 बूंद पेंट की दर से तटस्थ आसुत जल से पतला किया जाता है।

श्लेष्म बीजाणुओं को मेथिलीन ब्लू के 1% जलीय घोल से 30 - 60 मिनट के लिए दाग दिया जाता है, फिर तैयारी को पानी में धोया जाता है, क्रमिक रूप से बढ़ती ताकत (70, 80, 96% और निरपेक्ष) के अल्कोहल के माध्यम से पारित किया जाता है और जाइलीन के साथ स्पष्ट किया जाता है।

ब्लेज़हिन के अनुसार छोटे सेस्टोड को लैक्टिक एसिड कारमाइन से रंगा जा सकता है। लैक्टिक एसिड को आसुत जल से 2 बार पतला किया जाता है, थोड़ी मात्रा में कैरमाइन मिलाया जाता है (रंग की वांछित डिग्री के आधार पर)। तरल को उबाला जाता है. ताजी, अपरिवर्तित वस्तुओं को रंगना बेहतर है। धुंधला होने की अवधि की निगरानी एक माइक्रोस्कोप के तहत की जाती है, और दोबारा रंगाई के मामले में, वस्तु को रंग हटाने के लिए पूरे लैक्टिक एसिड में स्थानांतरित किया जाता है। रंगीन तैयारी को 20-60 मिनट तक धोया जाता है। नल का जलऔर बाम में डाल दिया.

बड़े सेस्टोड को रंगते समय, इस विधि को संशोधित किया गया था। सेस्टोड को गर्मियों में एक दिन के लिए, और ठंड के मौसम में 3-4 दिनों के लिए कमरे के तापमान पर बहते या बार-बार बदले जाने वाले नल के पानी में धोया जाता है। फिर उन्हें 4-6 घंटों के लिए पेंट में रखा जाता है (0.3 ग्राम कारमाइन प्रति 100 मिलीलीटर 30% लैक्टिक एसिड)। धुंधलापन की तीव्रता को माइक्रोस्कोप के तहत नियंत्रित किया जाता है। इसके बाद, एक दिन के लिए उन्हें आसुत जल में स्थानांतरित किया जाता है, जिसमें फेरस सल्फेट समाधान की 3 बूंदें और 1% फिनोल समाधान की 2 बूंदें डाली जाती हैं। इसके बाद, सेस्टोड को एक साफ कांच की स्लाइड में स्थानांतरित किया जाता है, सीधा किया जाता है और 30-37° के तापमान पर सुखाया जाता है। सूखी तैयारी, जो कांच से बहुत कसकर चिपकी होती है, को क्लोरोफॉर्म और पूर्ण अल्कोहल के बराबर भागों के मिश्रण में घोलकर कनाडा बाल्सम या रोसिन के साथ डाला जाता है।

अस्थायी तैयारी तैयार करने के लिए, नेमाटोड को दाग नहीं दिया जाता है, बल्कि 3-10 दिनों के लिए बिना पतला लैक्टिक एसिड या लैक्टोफेनोल समाधान (2 भाग ग्लिसरीन, 1 भाग लैक्टिक एसिड, 1 भाग फिनोल और 1 भाग पानी) में स्पष्टीकरण के लिए रखा जाता है। छोटे कृमियों को 1-2 दिनों के लिए लैक्टिक एसिड (1-2 बूंद) में रखा जाता है और कवरस्लिप से ढक दिया जाता है।

नेमाटोड की सूक्ष्म जांच के लिए स्थायी तैयारी निम्नानुसार तैयार की जाती है। 70% अल्कोहल में स्थिर जीवित हेल्मिंथ को 96% अल्कोहल में हर दूसरे दिन कई घंटों के लिए रखा जाता है (नेमाटोड के आकार के आधार पर), और फिर 3-5 मिनट के लिए पूर्ण अल्कोहल में रखा जाता है। इसके बाद, उन्हें 2-5 मिनट के लिए लौंग या चेनोपोडिया तेल या कार्बोक्सिलॉल में स्थानांतरित किया जाता है, और फिर एक साफ कांच की स्लाइड पर रखा जाता है और बाम से भर दिया जाता है।

सूंड और हुक का अध्ययन करने के लिए एकैन्थोसेफेलन्स (एसेंथोसेफेलियन) को स्पष्ट किया जाता है। ऐसा करने के लिए, उन्हें पहले 70% अल्कोहल से 50% ग्लिसरीन में और फिर शुद्ध में स्थानांतरित किया जाता है। अन्य अंगों की संरचना का अध्ययन कृमियों के पूर्ण निर्जलीकरण के बाद उन्हें धीरे-धीरे बढ़ती ताकत के अल्कोहल के माध्यम से पारित करके किया जाता है। पूर्ण अल्कोहल से, हेल्मिंथ को देवदार के तेल की एक बूंद में एक ग्लास स्लाइड में स्थानांतरित किया जाता है, एक कवरस्लिप के साथ कवर किया जाता है और सूक्ष्मदर्शी जांच की जाती है।

मेटागोनिमियासिस के लिए मछली की जांच

टी. क्रैसस में, जैविक चक्र समान होता है, लेकिन दूसरा मध्यवर्ती मेजबान अक्सर सैल्मन परिवार की मछली होती है, मुख्य रूप से व्हाइटफिश, जिसमें ट्राइनोफोरस लार्वा मांसपेशियों में स्थानीयकृत होता है। लार्वा भी एक संयोजी ऊतक कैप्सूल से घिरे होते हैं और आकार में बड़े होते हैं (एक मटर तक)। ट्राइनोफोरस प्लेरोसेरकोइड्स को टेपवर्म प्लेरोसेरकोइड्स से अलग किया जाना चाहिए, जो आकार और आकार में समान होते हैं। ऐसा करने के लिए, लार्वा को कांच की स्लाइडों के बीच रखा जाता है, कुचला जाता है और कम आवर्धन माइक्रोस्कोप के तहत जांच की जाती है। ट्राइनोफोरस लार्वा का सिर अंत दो फिक्सिंग उपकरणों से लैस है, जिनमें से प्रत्येक में चार हुक हैं और एक उड़ने वाले पक्षी की आकृति जैसा दिखता है। टेपवर्म लार्वा में एक सक्शन स्लिट होता है और कोई हुक नहीं होता है।

यदि मछली अच्छी और संतोषजनक स्थिति में है और मांसपेशियों के ऊतकों में कोई हाइड्रोमिया नहीं है, तो मछली को सूखा छोड़ दिया जाता है और थकी हुई मछली को अस्वीकार कर दिया जाता है और भोजन के लिए उपयोग किया जाता है।

उन्हें एक ग्लास स्लाइड पर रखा जाता है, आसुत जल की एक बूंद डाली जाती है, दूसरे ग्लास से ढक दिया जाता है और माइक्रोस्कोप के कम आवर्धन के तहत जांच की जाती है। लार्वा आकार में अंडाकार है, इसका आकार 0.4 मिमी है।

यदि मछलियाँ संतोषजनक स्थिति में हैं, तो उन्हें बिना किसी प्रतिबंध के छोड़ दिया जाता है; समाप्त हो चुकी मछलियों का उपयोग भोजन के रूप में किया जाता है।

यदि मछलियाँ थक जाती हैं या विकृत हो जाती हैं, तो उन्हें त्याग दिया जाता है। ऐसे परिवर्तनों के अभाव में, इसे सार्वजनिक खानपान प्रतिष्ठानों में भेजा जाता है, जहां, तराजू के साथ त्वचा को हटाने के बाद, इसे पकाया जाता है। डिब्बाबंद भोजन के उत्पादन के लिए मछली का उपयोग करने की अनुमति है और इसे नमक, धूम्रपान, अचार बनाने और सुखाने की अनुशंसा नहीं की जाती है।

सिस्ट द्वारा गंभीर क्षति (जब उनकी संख्या 20 से अधिक हो) या थकावट की स्थिति में, मछली का निपटान कर दिया जाता है। पर कमज़ोर हारउन्हें साफ किया जाता है और पेट भरने के बाद उन्हें पाक प्रसंस्करण के लिए भेजा जाता है या डिब्बाबंद भोजन तैयार करने के लिए उपयोग किया जाता है।

जोंकें हटा दी जाती हैं और मछलियों को बिना किसी प्रतिबंध के छोड़ दिया जाता है।

क्रस्टेशियन लोर्निया साइप्रिनॉस साइप्रिनिड्स को संक्रमित करता है। यह त्वचा में बस जाता है, इसका आकार 9-22 मिमी होता है।

मोटे ब्रशों से मछली के शरीर की सतह से क्रस्टेशियंस को साफ किया जाता है, जिसके बाद मछली को बिना किसी प्रतिबंध के छोड़ दिया जाता है। प्रभावित गलफड़ों को हटा देना चाहिए। थकावट और कई गहरे मांसपेशियों के घावों के मामले में, मछली को भोजन के उद्देश्य से भेजा जाता है।

राउंडवॉर्म से थोड़ी प्रभावित मछली भोजन के उपयोग के लिए उपयुक्त है। यदि आंतें, यकृत क्षतिग्रस्त हो जाते हैं, या गुहा में नेमाटोड पाए जाते हैं, तो मछली को पेट भरने के बाद छोड़ दिया जाता है। गंभीर नेमाटोड क्षति के मामलों में, जब मांस बन जाता है बुरी गंधया जलोदर के लक्षण हैं, तो मछली को चारे के लिए भेज दिया जाता है या नष्ट कर दिया जाता है।

कारपेट बीटल लार्वा से संक्रमित मछली का अध्ययन। यह भृंग केवल डिब्बाबंद मछलियों और विशेष रूप से सूखी और सूखी मछलियों को प्रभावित करता है। मादा अधिकतर अंडे गलफड़ों में देती है। चार दिनों के बाद, अंडे से एक लार्वा निकलता है - एक शशेल, जो मछली का एक कीट है। शशेल अंदर से तेज़ होता है मुलायम कपड़ेमछलियाँ, उन्हें खाकर और उन्हें धूल में बदल देती हैं। इसके अलावा, यह अपने मल से मछली को दूषित करता है और उसे एक अप्रिय गंध देता है।

स्वच्छता मूल्यांकन. यदि मछली चमड़े के बीटल के लार्वा से गंभीर रूप से क्षतिग्रस्त हो जाती है, साथ ही यदि इसकी ऑर्गेनोलेप्टिक विशेषताएं असंतोषजनक हैं, तो इसे अस्वीकार कर दिया जाता है। हल्की क्षति के मामले में (शैशेल केवल गिल गुहा में है), मछली को बिना किसी प्रतिबंध के छोड़ दिया जाता है।

चीज़ फ्लाई लार्वा से प्रभावित मछली का अध्ययन। पनीर मक्खी मछली के गलफड़ों, मुख गुहा, पंखों और यहां तक ​​कि कंटेनरों में भी अंडे देती है। एक लार्वा अंडे से निकलता है और विकास के कई चरणों से गुजरता है। अंतिम (तीसरे) चरण में लार्वा बहुत गतिशील होता है, किसी भी दिशा में कूद जाता है। वह इसे बहुत जल्दी खा लेती है मांसपेशियों का ऊतकऔर मछली का अवशेष कंकाल और त्वचा है। 15-22 दिनों के बाद लार्वा वयस्क मक्खी में बदल जाता है।

स्वच्छता मूल्यांकन. हल्की क्षति के मामले में, जब लार्वा मछली की सतह पर होता है, तो इसे साफ किया जाता है और बिना किसी प्रतिबंध के छोड़ दिया जाता है। गंभीर क्षति के मामले में, जो मांसपेशियों में लार्वा के टेढ़े-मेढ़े मार्ग की उपस्थिति से निर्धारित होती है, मछली को अस्वीकार कर दिया जाता है और तकनीकी निपटान के लिए भेज दिया जाता है।

छात्र, स्नातक छात्र, युवा वैज्ञानिक जो अपने अध्ययन और कार्य में ज्ञान आधार का उपयोग करते हैं, आपके बहुत आभारी होंगे।

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गलफड़ों में (कम अक्सर बाहरी आवरण) ताज़े पानी में रहने वाली मछलीक्रस्टेशियन एर्गाज़िलस रहता है। क्रस्टेशियंस सफेद दानों की तरह दिखते हैं। प्रभावित गलफड़ों में रक्तस्राव और परिगलित क्षय के क्षेत्र पाए जाते हैं।

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लिगुलोसिस से पीड़ित मछली के आंतरिक अंग संकुचित और रक्तहीन होते हैं।

Opisthorchis Metacercariae एन्कैप्सुलेटेड, अंडाकार आकार के सिस्ट होते हैं जो लगभग 0.3 मिमी लंबे और लगभग 0.24 मिमी चौड़े होते हैं। वे मुख्य रूप से रीढ़ की हड्डी की मांसपेशियों के चमड़े के नीचे के हिस्से में स्थानीयकृत होते हैं। ओपिसथोर्चिस लार्वा का अध्ययन करने के लिए, 2-3 मिमी मोटी मांसपेशियों के 2-3 टुकड़े काटे जाते हैं, कांच की स्लाइडों के बीच निचोड़े जाते हैं और कम आवर्धन माइक्रोस्कोप के नीचे देखे जाते हैं। ओपिसथोर्चिस लार्वा के बीच एक विशिष्ट अंतर एक कृमि की पुटी के अंदर उपस्थिति है - दो चूसने वाले और एक बड़े काले दानेदार धब्बे के साथ एडोलसेरिया।

टेपवर्म प्लेरोसेरकोइड्स और ओपिसथोर्चिस मेटासेरकेरिया से प्रभावित मछली को 30 मिनट तक उबाला जाता है या डिब्बाबंद भोजन तैयार करने के लिए उपयोग किया जाता है। ऐसी मछलियों को ठंड से निष्क्रिय करना भी संभव है: यदि टेपवर्म प्लेरोसेरकोइड्स से संक्रमित है, तो मछली को सात दिनों के लिए -8° के तापमान पर या ओपिसथोर्चिस मेटासेरकेरिया से संक्रमित होने पर -12° के तापमान पर प्रशीतन कक्षों में रखा जाता है; मछली को इससे अधिक तापमान पर नहीं जमाया जाता - 15°और कम से कम 14 दिनों तक खड़े रहें।

कार्य 3. कैवियार का स्वच्छता अध्ययन करें।

कार्य योजना: 1) कैवियार की व्यवस्थित रूप से जांच करें;

2) कैवियार की नमी की मात्रा निर्धारित करें;

3) कैवियार में टेबल नमक की मात्रा निर्धारित करें;

4) रेत की उपस्थिति के लिए अंडों की जांच करें;

5) टिन और सीसे के लिए अंडों की जांच करें (इस शोध को छोड़ा जा सकता है);

6) कैवियार में नाइट्रेट की मात्रा निर्धारित करें;

7) अंडों में अस्थिर आधारों की मात्रा निर्धारित करें;

8) कैवियार में एसिड संख्या निर्धारित करें;

9) कैवियार के ग्रेड और इसकी स्वच्छता गुणवत्ता पर एक राय दें।

उपकरण और अभिकर्मक:विभिन्न गुणवत्ता के कैवियार के नमूने; वज़न के साथ तकनीकी रासायनिक तराजू; स्थानिक; सुखाने की कैबिनेट; रेत की बोतलें; चीनी मिट्टी के कप; क्रूसिबल; फिल्टर; 100 मिली और 500 मिली वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क; शंक्वाकार फ्लास्क; अस्थिर पदार्थों के आसवन के लिए उपकरण; ओखली और मूसल; रासायनिक परीक्षण ट्यूब; सिल्वर नाइट्रेट, 0.1 एन घोल (एक ब्यूरेट में); पोटेशियम क्रोमेट; हाइड्रोक्लोरिक एसिड 10%; एसिटिक एसिड 5%; सोडियम क्लोराइड, क्रूड; नाइट्रेट निर्धारित करने के लिए मानक पैमाना (पाठ देखें); सल्फ्यूरिक एसिड में डिफेनिलमाइन (पाठ देखें); सांद्र सल्फ्यूरिक एसिड; अल्कोहल और ईथर का मिश्रण 1:2; फेनोल्फ्टामाइल 1%; कास्टिक पोटेशियम O,IN.